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本制品是基于Luminol的新一代增强型化学发光底物试剂，它由辣根过氧化物酶（HRP）催化发生化学反应，发出荧光，结果可以通过X光片压片和其他显影技术展现或使用Luminometer检测。溶液A主要成分为Luminol及特制发光增强剂。溶液B主要成分为H2O2及特制稳定剂。广泛应用于Western、Far-Western Blot、ELISA、Southern Blot、Northern Blot、Dot Blot等实验。

产品特点：
·灵敏度高：可检测pico级抗原。
·高信噪比，背景干净。发光迅速，持续时间达6小时以上。
·可检测低丰度蛋白，节省抗体（一抗1:2000-1:5000；二抗1:4000-1:10000）。

产品组成：

组分	WH0183-1	WH0183-2
试剂A	25ml	25ml×2
试剂B	25ml	25ml×2

保存条件：A液和B液2-8℃避光分别保存，保质期一年。

客户自备：
1．漂洗缓冲液：PBS中含0.05-0.1%的Tween-20。
2．封闭液：我公司推出的PA106或其他封闭液。
3．用封闭液或PBS稀释一抗，每个抗体的最佳稀释度根据实验来决定。
4．用封闭液或PBS稀释HRP标记的二抗，每个二抗的最佳稀释度根据实验来决定。
5．暗室、暗盒、X光片等曝光设备。

操作步骤：
1．封闭：将膜与封闭液室温振荡孵育60min，或4℃过夜。
2．将膜与用封闭液稀释的一抗室温振荡孵育1-2h或4℃过夜。
3．用漂洗缓冲液洗膜2-3次，每次5 min。
  注意：增加漂洗次数、加大漂洗缓冲液量将有助于降低背景。
4．将膜与用封闭液稀释的HRP标记的二抗室温振荡孵育1 h。
5．用漂洗缓冲液洗膜2-3次，每次5 min以除去未结合的HRP标记的二抗。
  注意：膜和二抗孵育后必须充分洗涤，以除去膜上未结合的HRP标记的二抗。
6．将底物试剂A和试剂B等体积混合制备底物工作液，底物工作液应现用现配。
  注意：底物试剂从4℃拿出后应平衡至室温，经实验证明反应温度是10-50℃，最佳反应温度是20-37℃。每cm2膜约需0.125ml的底物工作液，为了取得最佳效果，建议使用新鲜配制的底物工作液。
7．洗涤好的膜摆放到保鲜膜上，将底物工作液加到膜上后应立即用保鲜膜包好，迅速放入暗盒中进行曝光。
8．暗室中小心地将X光片压到膜上，先初始曝光1 min，观察结果。改变曝光时间以取得最佳效果。
  注意：发光反应的前5-30 min光信号最强，一般能持续数小时，但随着时间延长，光信号降低。若抗原含量低、信号弱，可以适当延长曝光时间。
相关搜索：HRP化学发光检测试剂，HRP Chemiluminescent Kit